El objetivo de la guía, puesta ya a disposición del público en las tienda del museo, es facilitar al visitante un mejor conocimiento de las obras expuestas y de los nuevos criterios de ordenación y presentación de las mismas.
La publicación recoge 130 obras ilustradas con los comentarios de las conservadoras Pilar Silva, jefe del departamento de Pintura Flamenca y Escuelas del Norte (1400-1600) y Pintura Española (1100-1500), y Leticia Ruiz, jefe de departamento del Área de Pintura Española.
Entre las obras presentes en la guía se encuentran obras maestras como "Santa Catalina", de Fernando Yáñez de la Almedina, "La Crucifixión", de Juan de Flandes, o las pinturas murales de la ermita de la Vera Cruz de Maderuelo.
La publicación constituye el segundo volumen de las guías de las colecciones de pintura del Museo del Prado, tras la edición dedicada a "El siglo XIX en el Prado".